:: Тест-системы фирмы Neogen ::

Тест-ситемы для количественного и качественного определения природных токсинов, пищевых бактерий и аллергенов фирмы Neogen Corporation (США)

Как работают тест-сиcтемы

Для обнаружения необходимых веществ во многих продуктах используются специальные иммунологические наборы. Удобные в использовании и интерпретации иммуноферментные методы, в основе которых лежит присоединение к антителам ферментной метки, позволяют учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению ее уровня. Антитела от фирмы Neogen отличаются высокой чувствительностью и их высокая эффективность подтверждена заказчиками по всему миру.

Для определения Neogen использует три варианта реакции, основанных на твердофазном гетерогенном иммунном анализе – ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). Ниже рассмотрен порядок проведения прямого фермент-связанного иммуносорбентного анализа (CD-ELISA) на полистероловых планшетах, который находит применение при определении гистаминов и микотоксинов.

Прямой фермент-связанный иммуносорбентный анализ (CD-ELISA)

Каждый тест содержит связанное антитело в планшете, которое является специфическим для определяемого вещества. Исследуемый образец и контроль добавляются в соответствующие лунки. Далее добавляется ферментный конъюгат (исследуемое вещество, химически связываемое с ферментом). Исследуемый образец/контроль вместе с конъюгатом перемешиваются и переносятся в лунки, где они конкурируют между собой за участки связывания антител. Чем больше определяемого вещества в образце, тем меньше конъюгата связывается в лунках.

После инкубации для удаления несвязанных веществ лунки промываются.

Субстрат, добавляемый в лунки, изменяет цвет в присутствии конъюгата. Во время инкубации окрашивание синим цветом происходит в соответствии с количеством конъюгата против определяемого вещества в лунках. Чем больше конъюгата свяжется, тем больше образуется синего цвета, указывающего на меньшее количество исследуемого вещества.

Выявление результатов проводится визуально: чем меньше синего цвета и больше красного, тем больше исследуемого вещества выявляется. При количественном определении результаты, получающиеся измерением цвета раствора, сравнивают со стандартной калибровочной кривой.

• Планшеты покрыты антителами специфичными к исследуемому веществу
  
  
• Конъюгат реагирует с исследуемым образцом и/или контролем для связывания с участками антител
  
  
• Конъюгат и исследуемое вещество и/или контроль остается в связанном состоянии в планшете
  
  
• Субстрат добавляется для изменения окраски
  
  
• Результаты выявляются визуально или с помощью детектора «ридера»: чем меньше синего цвета, больше красного, тем больше исследуемого субстрата выявляется